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保姆级 IGV 基因组浏览器使用指南(图文详解)

發(fā)布時(shí)間:2023/12/8 HTML 42 豆豆
生活随笔 收集整理的這篇文章主要介紹了 保姆级 IGV 基因组浏览器使用指南(图文详解) 小編覺得挺不錯(cuò)的,現(xiàn)在分享給大家,幫大家做個(gè)參考.

一、軟件下載

http://software.broadinstitute.org/software/igv/download

這里以下載 Windows 版本為例,下載帶有 Java 的版本,方便安裝。

由于大部分?jǐn)?shù)據(jù)是通過服務(wù)器跑出的結(jié)果,所以也有小伙伴有在 Linux 服務(wù)器端使用的需求。這里推薦幾種方式:

  • 配合遠(yuǎn)程控制軟件來使用,國產(chǎn)推薦 Todesk,向日葵
  • 話說目前有部分單位禁止遠(yuǎn)程軟件,推薦結(jié)合 Jupyter 來使用
  • 建立 FTP 來通過 url 訪問

建議最好安裝在固態(tài)硬盤所在分區(qū),提高加載速度。

如果沒有在桌面找到 IGV 軟件,按住 Win 鍵,搜索 igv 可以找到并運(yùn)行

IGV 有下載文件的需求,所以通過網(wǎng)絡(luò)訪問權(quán)限

二、軟件介紹

1、數(shù)據(jù)載入

為了方便介紹功能,我們需要先下載幾個(gè)測(cè)試數(shù)據(jù):

測(cè)試數(shù)據(jù)下載:

下面的數(shù)據(jù)來自人肝臟的 DNaseq 數(shù)據(jù),分別為bigbed 文件與 bigwig 文件:

bigbed 文件:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/download/?acc=GSE172690&format=file&file=GSE172690%5FENCFF812QNX%5Fpeaks%5Fmm10%2EbigBed

bigwig 文件:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/download/?acc=GSE172690&format=file&file=GSE172690%5FENCFF705ESF%5Fread%2Ddepth%5Fnormalized%5Fsignal%5Fmm10%2EbigWig

想了解更多基因組相關(guān)文件格式:https://blog.csdn.net/u011262253/article/details/109367884

載入數(shù)據(jù):

成功載入數(shù)據(jù)

切換其中一個(gè)染色體:

2、軟件面板

這里分五大部分來介紹:

  • 工具欄

  • 軌跡信息欄

  • 基因組窗口

  • 軌跡窗口

  • 基因窗口

1、工具欄

從左到右依次為劃分為三個(gè)小工具:

參考基因組工具

a. 選擇參考基因組物種及版本,如果沒有本地版本,需要聯(lián)網(wǎng)下載

b. 選擇染色體編號(hào)

c. 搜索染色體區(qū)間,格式如圖所示,最常用的功能還是輸入感興趣的基因,直接跳轉(zhuǎn)到對(duì)應(yīng)的位置

視圖操作工具

依次為主頁面,前一步,后一步,刷新,定義區(qū)域,Trace適屏,彈出信息顯示

縮放工具

用于控制整個(gè)視圖的縮放比例,快捷鍵

2、軌跡信息欄

右鍵可以打開菜單,進(jìn)一步修改,后面詳細(xì)來研究。

3、基因組窗口

上部分為整條染色體,點(diǎn)擊即可跳轉(zhuǎn)該位置

下半部分為目前染色體可見部分對(duì)于的染色體位置,用刻度線標(biāo)識(shí),單位為堿基數(shù)。

4、軌跡窗口

每一行代表一個(gè)樣本的 Trace

5、基因窗口

顯示基因的特征區(qū)域,可以與 Trace 面板配合,來查看研究區(qū)域的生物學(xué)信號(hào)。

三、常用操作

1、下載參考基因組及注釋

  • 左上角點(diǎn)擊 More:

  • 搜索物種名及其參考基因組版本:

    更多參考基因組知識(shí):https://blog.csdn.net/u011262253/article/details/117486244

  • 進(jìn)入下載進(jìn)度,這一步比較慢,建議科學(xué)上網(wǎng)或晚上掛著下載

2、數(shù)據(jù)加載

目前支持的格式包括:

  • 序列比對(duì):bam,cram
  • 基因組注釋:bed, gtf, gff3, psl, bigbed
  • 信號(hào)數(shù)據(jù):wig, bedgraph, bigwig, tdf
  • 拷貝數(shù):seg

拖動(dòng)文件到軌跡窗口

本地文件載入

右上角點(diǎn)擊 File -> Load from File,選擇本地文件即可

通過 URL 加載

如谷歌的數(shù)據(jù)gs://genomics-public-data/platinum-genomes/bam/NA12877_S1.bam,自己有服務(wù)器最好建立 ftp 站點(diǎn),方便查看

通過官方服務(wù)器加載

這里有一些公共項(xiàng)目的數(shù)據(jù)集,有興趣的小伙伴可以多瀏覽

3、搜索

在工具欄的搜索框輸入,圖中 C 的位置:

有幾種搜索方式:

  • 按基因組坐標(biāo)搜索:chr6:64,664,854-64,666,044
  • 按基因名搜索:如 pou5f1,但是不支持別名等其他名稱搜索
  • 按突變搜索,支持兩種格式:
    • 如KRAS:G12C,搜索 KRAS 第 12 個(gè)氨基酸上,從G 到 C 的突變。* 表示終止密碼子
    • 如 123A>T,搜索 KRAS 第 123 個(gè)氨基酸,從 A 到 T 的突變

4、放大縮小

  • 放大:
    • 雙擊軌跡窗口
    • 按住 Shift 健,單擊軌跡窗口
    • 點(diǎn)擊縮放工具 +
    • 在基因組標(biāo)尺窗口按住左鍵滑動(dòng),選中區(qū)域便會(huì)放大
  • 縮小:按住 Alt 健,單擊軌跡窗口

5、滾動(dòng)平移

  • 水平移動(dòng)
    • 按住左鍵在軌跡窗口左右拖動(dòng)
    • 點(diǎn)擊基因組標(biāo)尺或染色體圖
    • ← 和 →鍵
    • Home 和 End 鍵
  • 垂直滾動(dòng)
    • 按住左鍵在軌跡窗口上下拖動(dòng)
    • ↑ 和 ↓ 鍵
    • Page Up 和 Page Down 鍵

6、右鍵菜單

在軌跡信息欄和基因窗口都可以右鍵呼出如下菜單欄,我們?cè)诔鰣D時(shí)會(huì)依次用到

四、繪圖

1、折線圖

右鍵選擇折線圖選項(xiàng)

修改顏色

設(shè)置顏色

設(shè)置數(shù)據(jù)值域

這里試試設(shè)置不同的數(shù)據(jù)范圍,也就是值域,這里注意 Y 軸變化

  • 設(shè)置Min,Mid,Max 依次為 0,0,0.2,效果如下

  • 設(shè)置Min,Mid,Max 依次為 -0.2,0,0.2,效果如下

  • 設(shè)置Min,Mid,Max 依次為 -1,0,1,效果如下

最終效果如下:

2、散點(diǎn)圖

切換到散點(diǎn)圖選項(xiàng)

設(shè)置同折線圖,效果如下

3、條形圖

切換到條形圖

設(shè)置同折線圖,最終效果

4、熱圖

選擇熱圖選項(xiàng)

配置參數(shù)

設(shè)置

效果

總結(jié)一下,一共可以繪制四種圖,包括:

熱圖

折線圖

條形圖

散點(diǎn)圖

5、基因

右鍵可以打開設(shè)置菜單,一共有三種形式選擇:

堆疊形式

多個(gè)轉(zhuǎn)錄本堆疊在一起顯示

展開形式

分別顯示多條轉(zhuǎn)錄本

壓縮形式

樣本參數(shù)設(shè)置

基因特征顯示

6、保存圖片

支持格式兩種 png,svg。這兩種格式導(dǎo)出后,用 PS 和 AI 修改后就是論文中常見的圖啦。

總結(jié)

以上是生活随笔為你收集整理的保姆级 IGV 基因组浏览器使用指南(图文详解)的全部內(nèi)容,希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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