實(shí)驗(yàn)室方便的做法是用PAGE方法。使用加有7M尿素的16%的聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行電泳。取0.2-0.5OD的引物，用尿素飽和液溶解或引物溶液中加入尿素干粉直到飽和，上樣前加熱變性(95℃,2mins)。加入尿素的目的一是變性，二是增加樣品比重，容易加樣。600V電壓進(jìn)行電泳，一定時間后(約2-3小時)，剝膠，用熒光TLC板在紫外燈下檢測帶型，在主帶之下沒有雜帶，說明純度是好的。如果條件許可，也可以用銀染方式染色。

這個可以直接觀察核酸的整條曲線，那比光靠260,280兩個吸收值，肯定要準(zhǔn)確很多。可以跑一下瓊脂糖凝膠電泳，如果上下游引物亮度差很多，則可能是引物有問題。

除了常見的PAGE還有以下方法：高效液相色譜 (HPLC)以離子交換樹脂為填充料，可以非常有效的檢測出N-1或N-2短片段。毛細(xì)管凝膠電泳(CGE)基于尺寸排阻機(jī)理，可實(shí)現(xiàn)單核苷酸分離，可用于測定寡核苷酸純度，分辨率高，定量準(zhǔn)確。質(zhì)譜分析 (MS)MS是用電場和磁場將運(yùn)動的離子按它們的質(zhì)荷比分離后進(jìn)行檢測的方法。

總結(jié)

以上是生活随笔為你收集整理的如何检测引物的纯度？的全部內(nèi)容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

如果覺得生活随笔網(wǎng)站內(nèi)容還不錯，歡迎將生活随笔推薦給好友。