SELEX技術是指從隨機寡核苷酸文庫中篩選出對給定靶分子具高親和力的寡聚物,從而推論出那些對DNA或RNA結合蛋白具有很高親和力的配體。這些經SELEX篩選出的高親和序列可應用于多項研究以及疾病的診斷和治療等。用于篩選轉錄因子DNA結合序列時,該技術的基本步驟為：先體外化學合成一個兩端帶有PCR引物復性位點,中間含有待篩選隨機序列的單鏈寡核苷酸文庫,通過單引物復性及聚合酶延伸,形成雙鏈DNA文庫,再將文庫與轉錄因子蛋白混合,形成“DNA/蛋白質”復合物,分離出復合物中的DNA,并以其為模板進行PCR擴增,進行下一輪篩選過程;通過重復的篩選與擴增,最后得到高親和力和高特異性的DNA分子。該過程中,最關鍵一步就是如何將“DNA/蛋白質”復合物從游離DNA中分離出來,經典的篩選技術有凝膠阻滯法、親和層析法等。

總結

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