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对疾病进行DNA诊断的方法有哪些?

發(fā)布時(shí)間:2023/11/22 万象百科 30 博士
生活随笔 收集整理的這篇文章主要介紹了 对疾病进行DNA诊断的方法有哪些? 小編覺(jué)得挺不錯(cuò)的,現(xiàn)在分享給大家,幫大家做個(gè)參考.
這個(gè)有很多種,截止目前,常見(jiàn)的有:①基因的P C R 體外擴(kuò)增;② DNA液相雜交和固相點(diǎn)雜交;③限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性( R F L P ) 連鎖分析;④基因限制酶酶譜分析;⑤熒光原位雜交;⑥寡核苷酸探針雜交;⑦ DNA測(cè)序;⑧ DNA芯片;等多種方法都可以進(jìn)行DNA診斷。

1.基因雜交,用帶熒光標(biāo)記的DNA或RNA序列,與未知基因雜交,如果發(fā)生結(jié)合,說(shuō)明有互補(bǔ)序列,證明有該基因存在,如果不能雜交,證明沒(méi)有該基因。2.Southern印跡法(Southern blot)。其基本原理是:硝酸纖維膜或尼龍濾膜對(duì)單鏈DNA的吸附能力很強(qiáng),當(dāng)電泳后凝膠經(jīng)過(guò)DNA變性處理,覆以上述濾膜,再于其上方壓上多層干燥的吸水紙,借助它對(duì)深鹽溶液的上吸作用,凝膠上的單鏈DNA將轉(zhuǎn)移到濾膜上。轉(zhuǎn)移是原位的,即DNA片段的位置保持不變。轉(zhuǎn)移結(jié)束后,經(jīng)過(guò)80℃烘烤的DNA,將原位地固定于膜上?! ‘?dāng)含有特定基因片段已原位轉(zhuǎn)移到膜上后,即可與同位素標(biāo)記了的探針進(jìn)行雜交,并將雜交的信號(hào)顯示出來(lái)。雜交通常在塑料袋中進(jìn)行,袋內(nèi)放置上述雜交濾膜,加入含有變性后探針的雜交溶液后,在一定溫度下讓單鏈探針DNA與固定于膜上的單鏈基因DNA分子按堿基到互補(bǔ)原理充分結(jié)合。結(jié)合是特異的,例如只有β珠蛋白基因DNA才能結(jié)合上β珠蛋白的探針。雜交后,洗去膜上的未組合的探針,將Ⅹ線膠片覆于膜上,在暗盒中日光進(jìn)行放射自顯影。結(jié)合了同位素標(biāo)記探針的DNA片段所在部位將顯示黑色的雜交帶,基因的缺失或突變則可能導(dǎo)致帶的缺失或位置改變。

總結(jié)

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