我說一下我知道的部分。熒光定量PCR需要采用具有5‘-3’外切酶活性的Taq酶擴增，合成一對普通引物和一條熒光雙標記的Taq-Man探針。要準確體現表達水平，半定量RT-PCR, 熒光定量PCR擴增的循環數比常規少，擴增產物一般都要求處在線性區，如果擴增過程已到達平臺區，擴增產物就不能反映基因拷貝數的高低。

在檢測基因表達上qPCR應該比Northern blot更加靈敏，定量上也更準確，而且Northern blot在操作中比qPCR更容易被RNase污染。Northern blot用RNA上樣，中間可能涉及RNA提取，放置降解，等量上樣等問題，持續時間長，是傳統的方法。qPCR不用調模板濃度，根據管家基因歸一化，熒光檢測，快速。為保證結果正確，需一定的重復次數。

總結

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