可以先做blast，分析出有非同源的位點，再設計引物。設計好以后再在NCBI上做個primer-blast看一下特異性。設計p16ink4a和p19arf的引物時，我先看表達這兩個基因的不同exon，再在不同的exon上設計引物，得到的引物特異性就很好。

對于高度保守的兩個基因來說肯定會有不相同的堿基，設計引物的時候將引物設計在兩個基因的差異序列那里，然后再進行熒光定量PCR，如果兩個基因特別相近，就多設計幾對引物先跑個基本的PCR，要是一條能擴增另一條不能的話估計應該能行。

總結

以上是生活随笔為你收集整理的高度保守的两个基因，如何做qPCR？的全部內容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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