“基因魔剪”让癌症建模更准确高效
科技日?qǐng)?bào)北京 4 月 16 日電(記者張夢然)據(jù)開放獲取期刊《基因組醫(yī)學(xué)》16 日公開的一項(xiàng)研究,美國科學(xué)家報(bào)告了一種建立癌癥小鼠模型的新方法——利用有“基因魔剪”之稱的 CRISPR/Cas9 系統(tǒng)快速將癌癥相關(guān)基因敲入小鼠的 DNA 中。該方法以前所未有的高效,滿足了快速準(zhǔn)確建立動(dòng)物模型的需求。
研究通訊作者、麻省大學(xué)醫(yī)學(xué)院 RNA 療法研究所的王文說:“現(xiàn)有用來敲入致癌基因以建立癌癥模型的方法要么效率很低,要么難以控制敲入位置和敲入的拷貝數(shù)。CRISPR/Cas9 使得在目標(biāo)基因座插入大片段 DNA 成為可能,并且可應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)室的人類細(xì)胞以及小鼠中。我們研發(fā)出了一個(gè)新的系統(tǒng)——CRISPR-SONIC,可以在肝癌小鼠模型中靈活進(jìn)行基因敲入,且準(zhǔn)確率很高。”
CRISPR/Cas9 系統(tǒng)由一段向?qū)?RNA 和 Cas9 酶組成。為了將致癌基因插入活小鼠的基因組,團(tuán)隊(duì)使用了具有 2 個(gè)向?qū)?RNA 的 CRISPR/Cas9,進(jìn)行了一個(gè)三步驟的操作。首先,其中一個(gè)向?qū)?RNA 和 Cas9 酶一起對(duì)目標(biāo) DNA 位置進(jìn)行切割;第二步,另一個(gè)向?qū)?RNA 和 Cas9 會(huì)對(duì)一個(gè) DNA 環(huán)(即質(zhì)粒供體)進(jìn)行切割;第三步則是將已經(jīng)被切割成線狀的質(zhì)粒環(huán)插入目標(biāo)位置。
該方法在實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞中得到成功檢驗(yàn),也在小鼠身上完成了測試。團(tuán)隊(duì)觀察到在使用了 CRISPR-SONIC 后,樣本中約有 10% 的肝臟細(xì)胞成功帶上了綠色熒光蛋白(GFP)。這相對(duì)于之前那些方法大約 0.5% 的敲入效率來說,是一個(gè)巨大的提升。
該技術(shù)亦可用于建立生物發(fā)光癌癥模型,讓研究者們實(shí)時(shí)監(jiān)測癌細(xì)胞的生長和癌癥發(fā)展。
總編輯圈點(diǎn)
CRISPR 的威力在科學(xué)界無人不曉。去年引起軒然大波的基因編輯嬰兒的事件后,它也為一般公眾所知。這項(xiàng)簡易廉價(jià)卻高能的生物技術(shù)尚未完全發(fā)揮其潛力。此次它幫助建立癌癥動(dòng)物模型,在該方向走出重要一步。而很多其他疾病模型的創(chuàng)建也將從中獲得啟示。這類應(yīng)用可能是 CRISPR 目前最直接造福人類的手段。
總結(jié)
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