樣本選擇和處理

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蛋白分子參與生命活動(dòng)的各個(gè)過程，其功能復(fù)雜多樣，有些蛋白可能只在部分組織和細(xì)胞表達(dá)（圖2）。有些蛋白可能需要誘導(dǎo)，才能表達(dá)或表達(dá)量增加（圖3）。有些蛋白可能存在翻譯后修飾，導(dǎo)致其蛋白分子量大小可能與預(yù)測不符（圖3，4）。有些蛋白可能有多個(gè)異構(gòu)體或者容易被降解，導(dǎo)致出現(xiàn)多條條帶的現(xiàn)象（圖3）。因此，只有足夠了解您研究的蛋白特性，您才能在樣本的選擇和處理上得心應(yīng)手，美美的開啟您的 WB 之旅。

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?圖2. MMP9 在不同細(xì)胞系表達(dá)水平不同。

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Lane 1:	LoVo 全細(xì)胞裂解液
Lane 2:	Huh7 全細(xì)胞裂解液
Lane 3:	MCF7 全細(xì)胞裂解液
Lane 4:	HeLa 全細(xì)胞裂解液
Lane 5:	Caco-2 全細(xì)胞裂解液
Lane 6:	A549(血清饑餓誘導(dǎo)過夜)全細(xì)胞裂解液
Lane 7:	A549(血清饑餓誘導(dǎo)過夜，80nM TPA 處理24小時(shí))全細(xì)胞裂解液
Lane 8:	MDA-MB-231(血清饑餓誘導(dǎo)過夜)全細(xì)胞裂解液
Lane 9:	MDA-MB-231(血清饑餓誘導(dǎo)過夜后，200nM TPA 處理 24 小時(shí))全細(xì)胞裂解液
Lane 10:	HepG2 全細(xì)胞裂解液 ?

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總結(jié)

以上是生活随笔為你收集整理的WB实验关键点！附详细实验检查清单的全部內(nèi)容，希望文章能夠幫你解決所遇到的問題。

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